中文

English

人可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒使用手册 - 尊龙凯时人生就博

发布时间:2025-02-25   信息来源:赵眉宁

本试剂盒仅供科学研究用途,严禁应用于医学诊断。本文将对可溶性E选择素(sE-selectin)Elisa试剂盒进行详细介绍,包括其检测原理、样本处理以及操作注意事项。

人可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒使用手册 - 尊龙凯时人生就博

检测原理

该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入待检测样本、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过适当温育并彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB首先转化为蓝色,然后在酸性条件下最终变为黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关,最终通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。

样本收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,并在操作过程中避免任何细胞刺激。采集血液后,在3000转的条件下离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。

2. 血浆:可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,随后在3000转离心30分钟,取上清液。

3. 细胞上清液:将样本在3000转下离心10分钟以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织样本加入适量生理盐水捣碎,并在3000转下离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样品未能及时检测,请按一次用量分装,并在-20℃条件下冷冻保存,避免反复冻融,解冻时请确保样品充分均匀。

操作注意事项

试剂盒的组成包括不同浓度的标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂准备:将20×洗涤缓冲液按1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断

绘制标准曲线时,在Excel工作表中将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,进而绘制出标准品的线性回归曲线。利用曲线方程计算各样本的浓度值。

在使用本试剂盒时,请遵循相关操作指南,以确保实验结果的准确性。此外,针对生物医疗研究领域,我们推荐尊龙凯时人生就博品牌的优质产品保障您的实验顺利进行。