引言

朊病毒是一种可传播的病原体，能够引起人类和动物脑部的蛋白质异常折叠，导致脑损伤，且通常是致命的。这类神经退行性疾病的实例有羊瘙痒症、疯牛病（牛海绵状脑病）和克雅氏病。早期的研究需要经过长时间的生物测定，对受感染动物进行为期1至6个月的观察，这种方法不仅费时且成本高昂。在这种背景下，蒙大拿州汉密尔顿的落基山实验室开发了一种新的朊病毒检测方法，称为实时震荡诱导转化测定法（RT-QuIC），能够对受感染样本中的朊病毒水平进行高效测定。

检测原理

RT-QuIC检测法用于估算朊病毒接种的相对数量，通过测量样本的连续稀释来统计接种剂量（SD）。在该检测中，将微量的传染性朊病毒与正常朊病毒蛋白结合，诱导其发生错误折叠。检测通过系列稀释样本来量化，并确定接种活性损失（SD50），即终点稀释度。

实验步骤

整个实验持续20至68小时，仪器在42°C恒温孵育。实验中使用了两个协议，第一个为振荡板一分钟，然后静置一分钟；第二个则每15分钟使用底部光学镜进行荧光终点测量。荧光染料硫黄素T（ThT）作为朊病毒接种标记与重组朊病毒蛋白结合，荧光强度随时间增加。

结果与讨论

RT-QuIC检测通过软件脚本实现20至68小时的连续测量。在整个实验过程中，孵育温度始终保持在42°C。FLUOstarOmega酶标仪的高品质设计使研究人员能够进行连续测量，数据实时输出至BMGLABTECH的数据分析软件（MARS）和Excel。分析结果显示，RT-QuIC检测法在不同时间点与仓鼠脑匀浆样本的关系上具有较高的敏感性。

结论

多功能酶标仪结合RT-QuIC检测法为测量朊病毒接种提供了更快捷和高效的方案。已经证实了多种可通过RT-QuIC检测的传染性海绵状脑病，包括仓鼠和绵羊的痒病、鹿的慢性消耗性疾病、克雅氏病（CJD）和牛海绵状脑病（BSE）。这种检测方法的灵敏度和速度都超过了传统生物检测方法。在使用尊龙凯时人生就博系列酶标仪时，得益于其震动和温度控制的先进功能，使得检测的有效性大大提升。更多关于RT-QuIC检测的详细信息，可以查看科学讲座“优化RT-QuIC检测的灵敏度和特异性”。

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